Ang fluorescence microscopy nagbag-o sa atong abilidad sa paghanduraw ug pagtuon sa biological nga mga espesimen, nga nagtugot kanato sa pagsusi sa makuti nga kalibutan sa mga selula ug mga molekula. Usa ka mahinungdanong bahin sa fluorescence microscopy mao ang tinubdan sa kahayag nga gigamit sa pagpukaw sa mga molekula sa fluorescent sulod sa sample. Sulod sa mga katuigan, lain-laing mga tinubdan sa kahayag ang gigamit, ang matag usa adunay talagsaon nga mga kinaiya ug mga bentaha.
1. Mercury Lamp
Ang high-pressure nga mercury lamp, gikan sa 50 hangtod 200 watts, gihimo gamit ang quartz glass ug spherical ang porma. Kini adunay usa ka piho nga kantidad sa mercury sa sulod. Sa diha nga kini naglihok, usa ka discharge mahitabo tali sa duha ka electrodes, hinungdan sa mercury sa evaporate, ug ang internal nga pressure sa sphere paspas nga pagtaas. Kini nga proseso kasagarang mokabat ug mga 5 hangtod 15 ka minuto.
Ang pagbuga sa high-pressure nga mercury lamp nagresulta gikan sa pagkabungkag ug pagkunhod sa mga molekula sa mercury sa panahon sa pag-discharge sa electrode, nga nagdala sa pagpagawas sa mga light photon.
Nagpagawas kini og kusog nga ultraviolet ug blue-violet nga kahayag, nga naghimo niini nga angay alang sa kulbahinam nga nagkalainlain nga mga fluorescent nga mga materyales, mao nga kini kaylap nga gigamit sa fluorescence microscopy.
2. Xenon Lamps
Ang laing kasagarang gigamit nga puti nga tinubdan sa kahayag sa fluorescence microscopy mao ang xenon lamp. Ang mga lampara sa Xenon, sama sa mga lampara sa mercury, naghatag usa ka halapad nga spectrum sa mga wavelength gikan sa ultraviolet hangtod sa duol nga infrared. Bisan pa, magkalainlain sila sa ilang spectra sa pagpukaw.
Ang mga mercury lamp nagkonsentrar sa ilang pagbuga sa duol-ultraviolet, asul, ug berde nga mga rehiyon, nga nagsiguro sa pagmugna sa hayag nga fluorescent signal apan adunay kusog nga phototoxicity. Tungod niini, ang mga lampara sa HBO kasagarang gitagana alang sa mga fixed sample o huyang nga fluorescence imaging. Sa kasukwahi, ang mga tinubdan sa lampara sa xenon adunay usa ka hapsay nga profile sa excitation, nga nagtugot sa mga pagtandi sa intensity sa lain-laing mga wavelength. Kini nga kinaiya mapuslanon alang sa mga aplikasyon sama sa pagsukod sa konsentrasyon sa calcium ion. Ang mga lampara sa Xenon nagpakita usab og kusog nga paghinam-hinam sa duol nga infrared range, ilabina sa mga 800-1000 nm.
Ang mga lampara sa XBO adunay mga mosunod nga bentaha kaysa mga lampara sa HBO:
① Mas uniporme nga spectral intensity
② Mas kusog nga spectral intensity sa infrared ug mid-infrared nga mga rehiyon
③ Mas dako nga output sa enerhiya, nga mas sayon nga maabot ang aperture sa tumong.
3. Mga LED
Sa bag-ohay nga mga tuig, usa ka bag-ong contender ang mitumaw sa gingharian sa fluorescence microscopy light sources: LEDs. Ang mga LED nagtanyag sa bentaha sa paspas nga on-off nga pagbalhin sa mga millisecond, pagkunhod sa mga oras sa pagkaladlad sa sample ug pagpalugway sa kinabuhi sa mga delikado nga sample. Dugang pa, ang suga sa LED nagpakita sa dali ug tukma nga pagkadunot, nga makapakunhod sa phototoxicity sa dugay nga mga eksperimento sa live cell.
Kung itandi sa puti nga mga tinubdan sa kahayag, ang mga LED kasagarang mobuga sulod sa mas pig-ot nga spectrum sa excitation. Bisan pa, daghang mga LED nga banda ang magamit, nga nagtugot alang sa daghang gamit nga aplikasyon sa pag-fluorescence nga daghang kolor, nga naghimo sa mga LED nga labi ka sikat nga kapilian sa modernong mga pag-setup sa mikroskopya sa fluorescence.
4. Lasers Kahayag Tinubdan
Ang mga tinubdan sa kahayag sa laser hilabihan ka monochromatic ug direksyon, nga naghimo niini nga sulundon alang sa high-resolution nga microscopy, lakip ang mga super-resolution nga mga teknik sama sa STED (Stimulated Emission Depletion) ug PALM (Photoactivated Localization Microscopy). Ang kahayag sa laser kasagarang gipili aron mohaum sa espesipikong wavelength sa paghinam-hinam nga gikinahanglan alang sa target nga fluorophore, nga naghatag og taas nga pagpili ug katukma sa fluorescence excitation.
Ang pagpili sa usa ka fluorescence microscope light source nagdepende sa piho nga mga kinahanglanon sa eksperimento ug mga kinaiya sa sample. Palihug mobati nga gawasnon sa pagkontak kanamo kung kinahanglan nimo ang bisan unsang tabang
Oras sa pag-post: Sep-13-2023